그러나 이 방법은 대규모 응용이나 이런 의사환자 진단에 적합하지 않다. 바이러스 배양은 시간이 오래 걸리고, 현장 조건도 높아 (P3 실험실), 시효성이 임상요구에 미치지 못하기 때문이다.
병원학의 검사 수단 중 하나인 핵산검사, 효율이 매우 높아서 정상적인 상황에서 몇 시간 만에 결과를 알 수 있다. 그래서 이번 전염병에서 임상적으로 병원학 증거를 얻는 주요 방법은 바이러스 배양이 아니라 핵산검사.
핵산은 유전 정보의 전달체이며 DNA 와 RNA 의 총칭이다. 바이러스는 주로 유전물질과 단백질로 구성되어 있다. 신종 코로나 바이러스 (WHO) 는 일종의 RNA 바이러스로, 그 유전 물질은 단일 사슬 RNA 이다. 핵산검사 원리는 피실험자 삼키기 등 샘플에 바이러스 RNA 가 있는지 여부를 감지하는 것이다. 있다면 바이러스에 감염된 것입니다. 그럼, 우리는 바이러스의 RNA 를 이해했나요?
△RNA 와 DNA (사진 소스 네트워크)
우한 전염병 초기에, 중국 질병예방통제센터 (WHO) 는 매크로 게놈학 기술을 이용하여 단시간에 이 바이러스에 대한 검진을 완료하고 전체 게놈 서열을 얻었다. 이 바이러스의 전체 게놈 서열이 발표되자 실시간 형광 역전사 중합 효소 사슬 반응 (RT-PCR) 이 시약 급속히 발전했다.
이후 핵산검사 테스트 키트 응용은 임상에 적용돼 코로나 진단을 위한 병원학 근거를 제공한다. 그럼, 테스트 키트 핵산검사 사용 과정은 어떤가요?
첫째, 검사관은 시약 (IMF) 을 이용하여 샘플에서 핵산을 추출해야 한다. 그런 다음 분리된 핵산을 핵산 증폭 시약 에 넣고 핵산 증폭기에 넣으면 보통 두 시간 안에 결과가 나온다.
사실, 증폭은 조작 단계에서 매우 중요한 단계이다. 증폭의 의미는 미량 유전 정보의 기하급수적 증가에 있다. 샘플에 핵산 유전자 조각이 있는 한 PCR 을 통해 증폭시켜 바이러스의 전체 게놈 서열과 더 명확하게 비교할 수 있다.
실시간 형광 역전사 중합 효소 사슬 반응 (RT-PCR) 은 이미 임상 실험실에서 여러 해 동안 사용되어 왔다. 검사 체계가 성숙하여 특이성이 강하고 감도가 높으며 검사 주기가 짧고 정량검사 등의 장점을 가지고 있으며 바이러스 감염 정도와 치료 효과를 동적으로 모니터링할 수 있다.
중일우호병원 호흡과 중증 의학과 주임의사 진신은 기자와의 인터뷰에서 "핵산검사 매우 민감하다" 고 말했다. 환자의 분비물 샘플에서 바이러스 핵산의 일부를 발견하면 RT-PCR 증폭을 통해 서열에 통합할 수 있다.
"핵산이 살아 있는 바이러스에서 나온 것인지는 확실하지 않지만 호흡기 감염 증상이 있는 환자나 의심되는 환자의 경우 이 핵산을 삼키면 일반적으로 살아 있는 바이러스의 일부로 간주되며, 그 안에 바이러스 번식과 감염이 있다는 것을 간접적으로 증명한다." 진신이 기자에게 말했다.
핵산검사' 위음성' 이 생기기 쉽다
핵산검사 민감도가 높고 검사 주기가 짧다는 장점이 있지만 단점도 있다. 인체에서 직접 살아있는 바이러스를 분리하는 방식과는 달리, 핵산검사 () 는 간접적인 방법으로 가짜 음성으로 이어질 수 있다.
테스트 키트 최소 검출 한도 문제가 있기 때문에 채집된 샘플 중 바이러스 함량이 일정 수준에 도달해야만 검출할 수 있다. 드문 경우지만, 회복자는 회복하지 못할 수도 있지만, 샘플 중 바이러스 부하가 낮기 때문에 회복자의 핵산검사 결과는 음성이다. 즉, 우리가 흔히 말하는' 가짜 음성' 이다.
이에 따라' 신종 코로나 바이러스 진료규범 (시범 7 판)' 에서 퇴원기준 중 하나는 가래, 비 인두 면봉 등 호흡기 샘플이 두 번 연속 (샘플링 간격 최소 24 시간) 음성이었다.
호흡기 샘플을 선택해 핵산검사 하는 이유는 코로나 호흡기 전염병이기 때문에 호흡기 분비물에서 샘플을 얻는 것이 우선이다. 호흡기는 상부 호흡기와 하부 호흡기로 나뉘는데, 전자는 주로 코, 삼키기, 목을 포함한다. 후자는 주로 기관지, 주 기관지, 폐내 각급 기관지를 포함한다.
이에 따라 현재 의심되는 환자 중 바이러스 핵산을 검출하기 위해 수집한 샘플은 두 가지, 즉 상부호흡기 샘플과 하호흡기 샘플이다.
상부 호흡기 표본에는 주로 구강 면봉, 비 인두 면봉 (NPS) 및 비 인두 흡입물 (NPA) 이 포함됩니다. 하부 호흡기 표본은 주로 가래액, 기관지 흡입물, 기관지 폐포 세척액 (BALF) 을 포함한다.